首先,我們回顧一下NGS的基本流程:樣本收集—核酸提取—文庫構建—文庫質檢—上機測序—數(shù)據驗證;我們在進行NGS實驗的過程中,往往需要對中間或*終的核酸文庫進行質控。
目前主流的方法有3種:紫外吸收法、熒光光度法(Qubit)和qPCR方法!
紫外吸收法是較為傳統(tǒng)的核酸濃度定量方法,簡單快速,成本低廉,但其無法特異性區(qū)分DNA、RNA或蛋白質。并且,紫外分光光度計的靈敏度不足,無法完成低濃度DNA和RNA的**定量。
qPCR法**度高,靈敏度高,特異性強,需要配制PCR反應體系,儀器運行時間約1-2 h。
熒光光度法(Qubit)使用熒光染料結合核酸,操作較為簡便,濃度測定更為精準和靈敏??焖俚臋z測流程和包含的定量軟件使其成為文庫常規(guī)定量的理想選擇。
Qubit:Thermo Qubit熒光儀作為業(yè)內的金標準,能快速、準確、靈敏、特異性地定量DNA、RNA和蛋白質。Qubit 4 熒光儀采用專門研制的熒光檢測技術和熒光染料,這些熒光染料只有與特異性的靶分子結合時,才能發(fā)射熒光信號,即使有游離核苷酸或降解核酸存在,這些染料仍能發(fā)揮作用。Qubit 4 熒光定量即便在低濃度下亦具有目前**的 DNA 和 RNA 定量特異性和靈敏度。
杭州沃森生物提供NGS全流程產品優(yōu)化方案,本篇帶你了解Qubit儀器/試劑/耗材!
Qubit 儀器
Qubit 4 熒光儀和Qubit flex 熒光儀的區(qū)別和檢測原理
Qubit 試劑耗材
Qubit試劑耗材選擇指南(Thermo/麥伯)
備注:以上試劑耗材搭配使用,適配ThermoFisher Qubit 4 熒光儀、Qubit Flex 熒光儀!
Qubit 熒光儀與Qubit試劑耗材搭配使用,可在廣泛的濃度范圍內對DNA、RNA進行特異性定量,對常規(guī)分析和稀有珍貴樣品都適用。
如果您的實驗室需要更高通量,更高準確度和可靠性的核酸定量,杭州沃森生物為您提供Qubit 熒光儀與Qubit試劑耗材整體方案,滿足您獲得高度準確可靠、靈敏且特異的結果。